Misaotra anao nitsidika ny Nature.com. Voafetra ny fanohanan'ny CSS amin'ny dikan-tranonkala ampiasainao. Ho an'ny vokatra tsara indrindra, manoro hevitra ny fampiasana navigateur vaovao kokoa izahay (na manafoana ny fomba mifanaraka amin'ny Internet Explorer). Mandritra izany fotoana izany, mba hahazoana antoka fa mitohy ny fanohanana, dia hampiseho ny tranonkala tsy misy styles sy JavaScript izahay.
Ny fametrahana modely biby momba ny fiovana modika (MC) dia fototra manan-danja amin'ny fandalinana ny MC. Bitro fotsy Nouvelle-Zélande miisa 54 no nozaraina ho vondrona fandidiana sham, vondrona fametrahana hozatra (vondrona ME) ary vondrona fametrahana nucleus pulposus (vondrona NPE). Tao amin'ny vondrona NPE, naseho tamin'ny alalan'ny fandidiana anterolateral lumbar ny kapila intervertebral ary nampiasaina ny fanjaitra mba hanindrona ny vatan'ny hazondamosina L5 akaikin'ny takelaka farany. Nalaina avy amin'ny kapila intervertebral L1/2 tamin'ny alalan'ny syringe ny NP ary nampidirina tao anatiny. Nandavaka ny taolana subchondral. Mitovy amin'ny an'ny vondrona fametrahana NP ny fomba fandidiana sy ny fomba fandavahana tao amin'ny vondrona fametrahana hozatra sy ny vondrona fandidiana sham. Tao amin'ny vondrona ME, napetraka tao anaty lavaka ny sombin-kozatra iray, raha tsy nisy napetraka tao anaty lavaka kosa tao amin'ny vondrona fandidiana sham. Taorian'ny fandidiana, dia natao ny fitiliana MRI sy ny fitsapana biolojika molekiola. Niova ny famantarana tao amin'ny vondrona NPE, saingy tsy nisy fiovana miharihary tamin'ny famantarana tao amin'ny vondrona fandidiana sham sy ny vondrona ME. Ny fandinihana ara-batana dia naneho fa nisy fitomboan'ny sela tsy ara-dalàna hita teo amin'ny toerana fametrahana ny taolana, ary nitombo ny fanehoana ny IL-4, IL-17 ary IFN-γ tao amin'ny vondrona NPE. Ny fametrahana ny NP ao amin'ny taolana subchondral dia afaka mamorona modely biby an'ny MC.
Ny fiovana modika (MC) dia fery eo amin'ny takelaka farany amin'ny hazondamosina sy ny tsoka taolana mifanila aminy izay hita amin'ny alalan'ny sary magnetika resonance (MRI). Fahita matetika amin'ny olona manana soritr'aretina mifandraika amin'izany izy ireo1. Maro ny fanadihadiana no nanantitrantitra ny maha-zava-dehibe ny MC noho ny fifandraisany amin'ny fanaintainan'ny lamosina ambany (LBP)2,3. de Roos et al.4 sy Modic et al.5 no voalohany nanazava karazana tsy fetezan'ny famantarana subchondral telo samihafa ao amin'ny tsoka taolana amin'ny hazondamosina. Ny fiovana karazana modika I dia hypointense amin'ny filaharan'ny T1-weighted (T1W) ary hyperintense amin'ny filaharan'ny T2-weighted (T2W). Ity fery ity dia mampiseho takelaka farany amin'ny triatra sy ny tavy granulation vascular mifanila aminy ao amin'ny tsoka taolana. Ny fiovana karazana modika II dia mampiseho famantarana avo lenta amin'ny filaharan'ny T1W sy T2W. Amin'ity karazana fery ity, dia hita ny fahasimban'ny takelaka farany, ary koa ny fanoloana tavy histolojika amin'ny tsoka taolana mifanila aminy. Ny fiovana karazana modika III dia mampiseho famantarana ambany amin'ny filaharan'ny T1W sy T2W. Hita ny fery sclerotic mifanaraka amin'ny takelaka farany6. Ny MC dia heverina ho aretina patholojika amin'ny hazondamosina ary mifandray akaiky amin'ny aretina maro manimba ny hazondamosina7,8,9.
Raha jerena ny angon-drakitra misy, dia nisy fanadihadiana maromaro nanome fahatakarana amin'ny antsipiriany momba ny etiology sy ny mekanisma pathological an'ny MC. Albert et al. dia nanolo-kevitra fa ny MC dia mety ho vokatry ny herniation disc8. Hu et al. dia nilaza fa ny MC dia vokatry ny fahasimban'ny disc mafy10. Kroc dia nanolotra ny foto-kevitra momba ny "fahatapahan'ny disc anatiny," izay milaza fa ny ratra miverimberina amin'ny disc dia mety hiteraka microtears ao amin'ny endplate. Aorian'ny fiforonan'ny vaky, ny fahasimban'ny endplate ataon'ny nucleus pulposus (NP) dia mety hiteraka valinteny autoimmune, izay mitarika bebe kokoa amin'ny fivoaran'ny MC11. Ma et al. dia nizara fomba fijery mitovy amin'izany ary nitatitra fa ny autoimmunity vokatry ny NP dia mitana anjara toerana lehibe amin'ny pathogenesis an'ny MC12.
Ireo sela ao amin'ny rafi-kery fanefitra, indrindra fa ireo lymphocytes mpanampy CD4+ T, dia mitana anjara toerana lehibe amin'ny pathogenesis ny autoimmunity13. Ny vondron'ny Th17 vao hita dia mamokatra ny cytokine proinflammatory IL-17, mampiroborobo ny fanehoana chemokine, ary mandrisika ny sela T ao amin'ny taova simba mba hamokatra IFN-γ14. Ny sela Th2 koa dia mitana anjara toerana miavaka amin'ny pathogenesis ny valin-tenin'ny hery fiarovana. Ny fanehoana IL-4 ho toy ny sela Th2 solontena dia mety hiteraka voka-dratsy lehibe amin'ny immunopathologie15.
Na dia efa maro aza ireo fanadihadiana ara-pitsaboana natao tamin'ny MC16,17,18,19,20,21,22,23,24, dia mbola tsy ampy ireo modely fanandramana natao tamin'ny biby izay afaka manahaka ny fizotran'ny MC izay matetika mitranga amin'ny olombelona ary azo ampiasaina handinihana ny antony na fitsaboana vaovao toy ny fitsaboana voafaritra tsara. Hatramin'izao, modely biby vitsivitsy monja amin'ny MC no voalaza fa mandalina ny mekanisma patholojika fototra.
Mifototra amin'ny teoria momba ny autoimmune naroson'i Albert sy Ma, ity fandalinana ity dia nametraka modely MC bitro tsotra sy azo averina amin'ny alàlan'ny famindrana NP ho azy eo akaikin'ny takelaka faran'ny hazondamosina nolavahana. Ny tanjona hafa dia ny fandinihana ny toetran'ny biby sy ny fanombanana ny fomba fiasan'ny NP amin'ny fivoaran'ny MC. Mba hanaovana izany, dia mampiasa teknika toy ny biolojia molekiola, MRI, ary fandalinana histolojika izahay mba handinihana ny fivoaran'ny MC.
Bitro roa no maty noho ny rà nandritra ny fandidiana, ary bitro efatra no maty nandritra ny fanatoranana nandritra ny fitiliana MRI. Ireo bitro 48 sisa dia tafavoaka velona ary tsy naneho famantarana ara-pitondrantena na ara-pitatitra taorian'ny fandidiana.
Asehon'ny MRI fa samy hafa ny hamafin'ny famantarana ao amin'ny sela tafiditra ao anaty lavaka samihafa. Niova tsikelikely ny hamafin'ny famantarana ao amin'ny vatan'ny hazondamosina L5 ao amin'ny vondrona NPE tamin'ny 12, 16 ary 20 herinandro taorian'ny fampidirana (ny filaharan'ny T1W dia naneho famantarana ambany, ary ny filaharan'ny T2W dia naneho famantarana mifangaro miampy famantarana ambany) (Sary 1C), raha toa kosa ka nijanona ho marin-toerana ny fisehoan'ny MRI an'ireo vondrona roa hafa amin'ny ampahany tafiditra nandritra io vanim-potoana io ihany (Sary 1A, B).
(A) MRI mifanesy maneho ny hazondamosina bitro amin'ny fotoana 3. Tsy nisy tsy fetezan'ny famantarana hita tamin'ireo sary avy amin'ny vondrona fandidiana sham. (B) Mitovy amin'ny an'ny vondrona fandidiana sham ny toetran'ny famantarana ao amin'ny vatan'ny hazondamosina ao amin'ny vondrona ME, ary tsy misy fiovana lehibe hita eo amin'ny toerana fametrahana rehefa mandeha ny fotoana. (C) Ao amin'ny vondrona NPE, hita mazava tsara ao amin'ny filaharan'ny T1W ny famantarana ambany, ary hita mazava tsara ao amin'ny filaharan'ny T2W ny famantarana mifangaro sy ny famantarana ambany. Manomboka amin'ny fe-potoana 12 herinandro ka hatramin'ny fe-potoana 20 herinandro, mihena ireo famantarana avo mitsitaitaika manodidina ny famantarana ambany ao amin'ny filaharan'ny T2W.
Hita miharihary eo amin'ny toerana fametrahana ny vatan'ny hazondamosina ao amin'ny vondrona NPE ny hyperplasia taolana, ary mitranga haingana kokoa ny hyperplasia taolana eo anelanelan'ny 12 ka hatramin'ny 20 herinandro (Sary 2C) raha oharina amin'ny vondrona NPE, tsy misy fiovana lehibe hita eo amin'ny vatan'ny hazondamosina namboarina; vondrona Sham sy vondrona ME (Sary 2C) 2A,B).
(A) Malama tsara ny velaran'ny vatan'ny hazondamosina eo amin'ny faritra nambolena, sitrana tsara ny lavaka, ary tsy misy hyperplasia eo amin'ny vatan'ny hazondamosina. (B) Mitovy amin'ny an'ny vondrona fandidiana sandoka ny endriky ny toerana nambolena ao amin'ny vondrona ME, ary tsy misy fiovana miharihary eo amin'ny endriky ny toerana nambolena rehefa mandeha ny fotoana. (C) Nitranga ny hyperplasia taolana teo amin'ny toerana nambolena tao amin'ny vondrona NPE. Nitombo haingana ny hyperplasia taolana ary niitatra hatrany amin'ny kapila intervertebral ka hatrany amin'ny vatan'ny hazondamosina kontralateral.
Ny fanadihadiana histolojika dia manome fampahalalana amin'ny antsipiriany kokoa momba ny fiforonan'ny taolana. Ny Sary 3 dia mampiseho ny sarin'ireo fizarana taorian'ny fandidiana nolokoina tamin'ny H&E. Tao amin'ny vondrona fandidiana sham-operation, dia milamina tsara ireo chondrocytes ary tsy nisy fitomboan'ny sela hita (Sary 3A). Mitovy amin'ny tao amin'ny vondrona fandidiana sham-operation ny toe-javatra tao amin'ny vondrona ME (Sary 3B). Na izany aza, tao amin'ny vondrona NPE, dia nahitana chondrocytes maro be sy fitomboan'ny sela mitovy amin'ny NP teo amin'ny toerana fametrahana azy (Sary 3C);
(A) Hita eo akaikin'ny takelaka farany ny trabeculae, milamina tsara ny filaharan'ny chondrocytes miaraka amin'ny haben'ny sela sy ny endriny mitovy ary tsy misy fitomboana (in-40). (B) Mitovy amin'ny an'ny vondrona sham ny toe-javatra misy ny toerana fametrahana ao amin'ny vondrona ME. Hita ny trabeculae sy ny chondrocytes, saingy tsy misy fitomboana miharihary eo amin'ny toerana fametrahana (in-40). (B) Hita fa mitombo be ny chondrocytes sy ny sela mitovy amin'ny NP, ary tsy mitovy ny endrika sy ny haben'ny chondrocytes (in-40).
Hita tao amin'ny vondrona NPE sy ME ny fanehoana ny interleukin 4 (IL-4) mRNA, ny interleukin 17 (IL-17) mRNA, ary ny interferon γ (IFN-γ) mRNA. Rehefa nampitahaina ny haavon'ny fanehoana ny fototarazo kendrena, dia nitombo be ny fanehoana ny fototarazo IL-4, IL-17, ary IFN-γ tao amin'ny vondrona NPE raha oharina amin'ny an'ny vondrona ME sy ny vondrona sham operation (Sary 4) (P < 0.05). Raha ampitahaina amin'ny vondrona sham operation, dia nitombo kely fotsiny ny haavon'ny fanehoana ny IL-4, IL-17, ary IFN-γ tao amin'ny vondrona ME ary tsy nahatratra fiovana ara-statistika (P > 0.05).
Ny fanehoana mRNA an'ny IL-4, IL-17 ary IFN-γ ao amin'ny vondrona NPE dia naneho fironana ambony kokoa noho ireo tao amin'ny vondrona sham operation sy ny vondrona ME (P < 0.05).
Mifanohitra amin'izany kosa, ny haavon'ny fanehoana ao amin'ny vondrona ME dia tsy naneho fahasamihafana manan-danja (P>0.05).
Natao ny fanadihadiana Western blot tamin'ny fampiasana antikôra azo vidiana eny an-tsena manohitra ny IL-4 sy IL-17 mba hanamafisana ny fiovan'ny endriky ny fanehoana mRNA. Araka ny aseho amin'ny Sary 5A, B, raha ampitahaina amin'ny vondrona ME sy ny vondrona sham operation, dia nitombo be ny haavon'ny proteinina IL-4 sy IL-17 ao amin'ny vondrona NPE (P < 0.05). Raha ampitahaina amin'ny vondrona sham operation, dia tsy nahatratra fiovana manan-danja ara-statistika ihany koa ny haavon'ny proteinina IL-4 sy IL-17 ao amin'ny vondrona ME (P> 0.05).
(A) Ny haavon'ny proteinina IL-4 sy IL-17 tao amin'ny vondrona NPE dia avo kokoa noho ny tao amin'ny vondrona ME sy ny vondrona placebo (P < 0.05). (B) Histograma Western blot.
Noho ny habetsahan'ny santionan'olombelona azo nandritra ny fandidiana dia somary sarotra ny fanadihadiana mazava sy amin'ny antsipiriany momba ny pathogenesis an'ny MC. Niezaka nametraka modely biby momba ny MC izahay mba handinihana ny mety ho mekanisma patholojika. Nandritra izany fotoana izany, nampiasaina ny fanombanana radiolojika, ny fanombanana histolojika ary ny fanombanana biolojika molekiola mba hanarahana ny fizotran'ny MC vokatry ny NP autograft. Vokatr'izany, ny modely fametrahana NP dia niafara tamin'ny fiovana miandalana teo amin'ny hamafin'ny famantarana avy amin'ny teboka 12 herinandro ka hatramin'ny 20 herinandro (famantarana ambany mifangaro amin'ny filaharan'ny T1W sy famantarana ambany amin'ny filaharan'ny T2W), izay manondro ny fiovan'ny sela, ary ny fanombanana histolojika sy molekiola biolojika dia nanamafy ny vokatry ny fanadihadiana radiolojika.
Ny vokatry ny andrana dia mampiseho fa nisy fiovana hita maso sy ara-histolojika nitranga teo amin'ny toerana nisy ny fanitsakitsahana ny vatan'ny hazondamosina tao amin'ny vondrona NPE. Mandritra izany fotoana izany, dia hita ny fanehoana ny fototarazo IL-4, IL-17 ary IFN-γ, ary koa ny IL-4, IL-17 ary IFN-γ, izay manondro fa ny fanitsakitsahana ny sela autologous nucleus pulposus ao amin'ny vatan'ny hazondamosina dia mety hiteraka andiana fiovana famantarana sy morfolojika. Mora ny mahita fa ny toetran'ny famantarana amin'ny vatan'ny hazondamosina amin'ny modely biby (famantarana ambany amin'ny filaharan'ny T1W, famantarana mifangaro ary famantarana ambany amin'ny filaharan'ny T2W) dia mitovy amin'ny an'ny sela hazondamosina olombelona, ary ny toetran'ny MRI dia manamafy ihany koa ny fandinihana ny histolojia sy ny anatomia ankapobeny, izany hoe, ny fiovana eo amin'ny sela vatan'ny hazondamosina dia miandalana. Na dia mety hiseho tsy ho ela aorian'ny fandidiana aza ny valin'ny fivontosana vokatry ny ratra mafy, ny valin'ny MRI dia naneho fa ny fiovan'ny famantarana mitombo tsikelikely dia niseho 12 herinandro aorian'ny fandidiana ary naharitra hatramin'ny 20 herinandro tsy misy famantarana ny fahasitranana na ny fiverenan'ny fiovan'ny MRI. Ireo vokatra ireo dia manondro fa ny autologous vertebral NP dia fomba azo itokisana hametrahana MV miandalana amin'ny bitro.
Ity modely fanindronana ity dia mitaky fahaiza-manao, fotoana ary ezaka amin'ny fandidiana. Amin'ny fanandramana mialoha, ny fanesorana na ny fientanentanana tafahoatra ny rafitry ny ligamenta paravertebral dia mety hiteraka fiforonan'ny osteophytes vertebral. Tokony hotandremana mba tsy hanimba na hanelingelina ireo kapila mifanila. Satria tsy maintsy fehezina ny halalin'ny fidirana mba hahazoana vokatra mitovy sy azo averina, dia nanao "plug" tanana izahay tamin'ny fanapahana ny fonony fanjaitra 3 mm ny lavany. Ny fampiasana ity "plug" ity dia miantoka ny halaliny mitovy amin'ny fandavahana ao amin'ny vatan'ny vertebral. Tamin'ny fanandramana mialoha, mpandidy taolana telo nandray anjara tamin'ny fandidiana dia nahita fa mora kokoa ny miasa amin'ny fanjaitra 16-gauge noho ny fanjaitra 18-gauge na fomba hafa. Mba hisorohana ny rà mandriaka be loatra mandritra ny fandavahana, ny fitazonana ny fanjaitra tsy mihetsika mandritra ny fotoana kelikely dia hanome lavaka fampidirana mety kokoa, izay manondro fa azo fehezina amin'izany fomba izany ny ambaratongan'ny MC sasany.
Na dia maro aza ireo fanadihadiana no nifantoka tamin'ny MC, dia mbola tsy dia fantatra loatra ny momba ny antony sy ny pathogenesis an'ny MC25,26,27. Mifototra amin'ireo fanadihadiana nataonay teo aloha, dia hitanay fa ny autoimmunity dia mitana anjara toerana lehibe amin'ny fisian'ny sy ny fivoaran'ny MC12. Ity fanadihadiana ity dia nandinika ny fanehoana ny IL-4, IL-17, ary IFN-γ, izay lalan'ny fiforonan'ny sela CD4+ taorian'ny fanentanana ny antigen. Tao amin'ny fanadihadianay, raha oharina amin'ny vondrona ratsy, ny vondrona NPE dia nanana fanehoana IL-4, IL-17, ary IFN-γ ambony kokoa, ary ny haavon'ny proteinina IL-4 sy IL-17 dia ambony kokoa ihany koa.
Ara-pitsaboana, mitombo ny fanehoana mRNA IL-17 ao amin'ny sela NP avy amin'ny marary voan'ny herniation kapila28. Nitombo ihany koa ny haavon'ny fanehoana IL-4 sy IFN-γ tamin'ny modely herniation kapila tsy misy fanerena raha oharina amin'ny olona salama29. Ny IL-17 dia mitana anjara toerana lehibe amin'ny fivontosana, ny ratra amin'ny sela amin'ny aretina autoimmune30 ary manatsara ny valin-kafatra amin'ny hery fiarovana amin'ny IFN-γ31. Notaterina ny fitomboan'ny ratra amin'ny sela vokatry ny IL-17 tamin'ny totozy MRL/lpr32 sy ny totozy mora voan'ny autoimmune33. Ny IL-4 dia afaka manakana ny fanehoana cytokines proinflammatory (toy ny IL-1β sy TNFα) ary ny fampahavitrihana macrophage34. Voalaza fa ny fanehoana mRNA an'ny IL-4 dia tsy mitovy amin'ny vondrona NPE raha oharina amin'ny IL-17 sy IFN-γ amin'ny fotoana iray ihany; Ny fanehoana mRNA an'ny IFN-γ ao amin'ny vondrona NPE dia avo kokoa noho ny an'ny vondrona hafa. Noho izany, ny famokarana IFN-γ dia mety ho mpanelanelana amin'ny valin-kafatra amin'ny fivontosana vokatry ny intercalation NP. Ny fanadihadiana dia naneho fa ny IFN-γ dia novokarin'ny karazana sela maro, anisan'izany ny sela T mpanampy karazany 1 miasa, ny sela mpamono voajanahary, ary ny macrophages35,36, ary cytokine mpanentana ny fivontosana izay mampiroborobo ny fiasan'ny hery fiarovana37.
Ity fanadihadiana ity dia manoro hevitra fa mety ho tafiditra amin'ny fisian'ny sy fivoaran'ny MC ny valin-kafatra autoimmune. Hitan'i Luoma et al. fa mitovy amin'ny MRI ny toetran'ny famantarana ny MC sy ny NP misongadina, ary samy mampiseho famantarana avo lenta amin'ny filaharan'ny T2W38. Voamarina fa mifandray akaiky amin'ny fisian'ny MC ny cytokines sasany, toy ny IL-139. Nanoro hevitra i Ma et al. fa ny fivoahan'ny NP miakatra na midina dia mety hisy fiantraikany lehibe amin'ny fisian'ny sy fivoaran'ny MC12. Bobechko40 sy Herzbein et al.41 dia nitatitra fa ny NP dia sela tsy mahazaka hery fiarovana izay tsy afaka miditra amin'ny fivezivezen'ny lalan-dra hatramin'ny nahaterahana. Ny fivoahan'ny NP dia mampiditra zavatra vahiny ao amin'ny famatsian-dra, ka mahatonga ny fihetsika autoimmune eo an-toerana42. Ny fihetsika autoimmune dia mety hiteraka singa fiarovana maro, ary rehefa tratran'ny sela tsy tapaka ireo singa ireo, dia mety hiteraka fiovana amin'ny famantarana43. Ato amin'ity fanadihadiana ity, ny fivoahan'ny IL-4, IL-17 ary IFN-γ dia singa fiarovana mahazatra, izay manaporofo bebe kokoa ny fifandraisana akaiky eo amin'ny NP sy MCs44. Ity modely biby ity dia manahaka tsara ny fivoaran'ny NP sy ny fidirana ao amin'ny takelaka farany. Ity dingana ity dia naneho bebe kokoa ny fiantraikan'ny autoimmunity amin'ny MC.
Araka ny efa nampoizina, ity modely biby ity dia manome antsika sehatra azo atao handinihana ny MC. Na izany aza, mbola misy fetrany ihany ity modely ity: voalohany, mandritra ny dingana fandinihana ny biby, ny bitro sasany amin'ny dingana antonony dia mila vonoina ho faty mba hanaovana fitiliana biolojia histolojika sy molekiola, ka ny biby sasany dia "tsy ampiasaina intsony" rehefa mandeha ny fotoana. Faharoa, na dia misy fotoana telo voafaritra ato amin'ity fandalinana ity aza, indrisy fa karazana MC iray ihany no nohavaozinay (fiovana Modic type I), ka tsy ampy hanehoana ny fizotran'ny fivoaran'ny aretin'olombelona izany, ary mila fotoana bebe kokoa hametrahana mba handinihana tsara kokoa ny fiovan'ny famantarana rehetra. Fahatelo, ny fiovan'ny rafitry ny sela dia azo aseho mazava tsara amin'ny alàlan'ny fandokoana histolojika, saingy misy teknika manokana afaka mampiseho tsara kokoa ny fiovan'ny microstructure amin'ity modely ity. Ohatra, ny mikroskopia hazavana polarized dia nampiasaina handinihana ny fiforonan'ny fibrocartilage amin'ny kapila intervertebral bitro45. Ny fiantraikan'ny NP maharitra amin'ny MC sy ny endplate dia mitaky fandalinana bebe kokoa.
Bitro fotsy lahy Nouvelle-Zélande miisa 54 (mirefy 2.5-3 kg eo ho eo, 3-3.5 volana ny taonany) no nozaraina an-tsokosoko ho vondrona fandidiana sandoka, vondrona fametrahana hozatra (vondrona ME) ary vondrona fametrahana fakany nerveo (vondrona NPE). Neken'ny Komitin'ny Etika ao amin'ny Hopitaly Tianjin ny fomba fanandramana rehetra, ary notanterahina araka ny torolalana efa nekena ny fomba fanandramana rehetra.
Nisy fanatsarana natao tamin'ny teknika fandidiana nataon'i S. Sobajima 46. Napetraka tamin'ny toerana mandry mitongilana ny bitro tsirairay ary naseho tamin'ny alalan'ny fomba retroperitoneal posterolateral ny velaran'ny kapila intervertebral (IVD) dimy mifanesy eo anoloana. Nomena fanatoranana ankapobeny ny bitro tsirairay (20% urethane, 5 ml/kg amin'ny alalan'ny lalan-tsofina). Natao ny fandidiana hoditra lava avy amin'ny sisiny ambany amin'ny taolan-tehezana ka hatrany amin'ny sisin'ny valahana, 2 sm eo amin'ny ventral ka hatrany amin'ny hozatra paravertebral. Naseho tamin'ny alalan'ny fandidiana maranitra sy tsy misy dikany ny sela subcutaneous eo amboniny, ny sela retroperitoneal, ary ny hozatra ny hazondamosina anterolateral havanana avy amin'ny L1 ka hatramin'ny L6 (Sary 6A). Ny haavon'ny kapila dia voafaritra tamin'ny fampiasana ny sisin'ny valahana ho toy ny mari-pamantarana anatomika ho an'ny haavon'ny kapila L5-L6. Ampiasao fanjaitra fanindronana 16-gauge mba handavahana lavaka akaikin'ny takelaka faran'ny vertebra L5 hatramin'ny halaliny 3 mm (Sary 6B). Ampiasao syringe 5 ml mba hisintonana ny nucleus pulposus autologous ao amin'ny kapila intervertebral L1-L2 (Sary 6C). Esory ny nucleus pulposus na ny hozatra araka ny takian'ny vondrona tsirairay. Rehefa avy nohalalinina ny lavaka, dia asiana zaitra azo sintonina eo amin'ny fascia lalina, fascia ambony ary hoditra, ary tandremo tsara mba tsy hanimba ny sela periosteal amin'ny vatan'ny hazondamosina mandritra ny fandidiana.
(A) Aseho amin'ny alalan'ny fomba retroperitoneal posterolateral ny kapila L5–L6. (B) Ampiasao fanjaitra 16-gauge handavahana lavaka eo akaikin'ny takelaka farany L5. (C) Angonina ireo MF Autologous.
Nomena fanatoranana ankapobeny tamin'ny alalan'ny lalan-tsofina ny urethane 20% (5 ml/kg), ary naverina natao ny radiografia tao amin'ny hazondamosina lumbar tamin'ny 12, 16, ary 20 herinandro taorian'ny fandidiana.
Novonoina tamin'ny alalan'ny tsindrona ketamine (25.0 mg/kg) tao amin'ny ati-doha sy ny fampidirana pentobarbital sodium (1.2 g/kg) tao amin'ny lalan-drà ireo bitro, 12, 16 ary 20 herinandro taorian'ny fandidiana. Nesorina ny hazondamosina manontolo mba hanaovana fanadihadiana momba ny sela ary natao ny fanadihadiana tena izy. Nampiasaina ny fandikana mivadika amin'ny alalan'ny quantitative (RT-qPCR) sy ny Western blotting mba hamantarana ny fiovan'ny singa fiarovana.
Natao tamin'ny bitro ny fizahana MRI tamin'ny alalan'ny fampiasana andriamby klinika 3.0 T (GE Medical Systems, Florence, SC) misy mpandray coil orthogonal limb. Nomena fanatoranana tamin'ny urethane 20% (5 mL/kg) tamin'ny alalan'ny lalan-tsofina ny bitro ary avy eo napetraka mandry ao anatin'ilay andriamby miaraka amin'ny faritra lumbar mifantoka amin'ny coil boribory 5 santimetatra ny savaivony (GE Medical Systems). Nalaina ny sary localizer Coronal T2-weighted (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) mba hamaritana ny toerana misy ny kapila lumbar avy amin'ny L3–L4 ka hatramin'ny L5–L6. Nalaina ny silaka sagittal plane T2-weighted tamin'ireto fanovana manaraka ireto: fast spin-echo sequence miaraka amin'ny fotoana famerimberenana (TR) 2200 ms ary fotoana echo (TE) 70 ms, matrix; sehatry ny fahitana 260 sy stimuli valo; Ny hatevin'ny fanapahana dia 2 mm, ny elanelana dia 0.2 mm.
Rehefa avy nalaina ny sary farany ary novonoina ny bitro farany, dia nesorina ny kapila sandoka, ny kapila misy hozatra, ary ny kapila NP mba hanaovana fizahana histolojika. Nofatorana tao anaty formaline 10% tsy miandany nandritra ny herinandro ny sela, nodiovina tamin'ny asidra ethylenediaminetetraacetic, ary notapatapahina ny parafine. Napetraka tao anaty parafine ny sakana sela ary notapatapahina ho fizarana sagittal (5 μm ny hateviny) tamin'ny fampiasana microtome. Nolokoina tamin'ny hematoxylin sy eosin (H&E) ny fizarana.
Rehefa avy nanangona ireo kapila intervertebral avy amin'ireo bitro isaky ny vondrona, dia nalaina ny ARN manontolo tamin'ny fampiasana tsanganana UNIQ-10 (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., Sina) araka ny toromariky ny mpanamboatra sy ny rafitra fandikana mivadika ImProm II (Promega Inc., Madison, WI, Etazonia). Natao ny fandikana mivadika.
Natao tamin'ny alalan'ny Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., Etazonia) sy SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, Etazonia) ny RT-qPCR araka ny toromariky ny mpanamboatra. 20 μl ny habetsaky ny fihetsiky ny PCR ary nisy cDNA voatsatso 1.5 μl sy primer 0.2 μM tsirairay. Ny OligoPerfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA) no namorona ny primer ary novokarin'ny Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (Shina) (Tabilao 1). Ireto fepetra manaraka ireto no nampiasaina tamin'ny tsingerin'ny hafanana: dingana voalohany amin'ny fampahavitrihana ny polymerase amin'ny 94°C mandritra ny 2 minitra, avy eo tsingerina 40 isaky ny 15 segondra amin'ny 94°C ho an'ny denaturation template, fanafanana mandritra ny 1 minitra amin'ny 60°C, fanitarana, ary fluorescence. Natao nandritra ny 1 minitra tamin'ny 72°C ny fandrefesana. Nohamafisina intelo ny santionany rehetra ary nampiasaina ho an'ny fanadihadiana RT-qPCR ny sanda antonony. Nohadihadiana tamin'ny alalan'ny FlexStation 3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, Etazonia) ny angon-drakitra momba ny fanamafisana. Namboarina ho amin'ny fanaraha-maso endogenous (ACTB) ny fanehoan'ny fototarazo IL-4, IL-17, ary IFN-γ. Nokajiana tamin'ny alalan'ny fomba 2-ΔΔCT ny haavon'ny fanehoan'ny mRNA kendrena.
Nalaina avy amin'ny sela ny proteinina manontolo tamin'ny fampiasana homogenizer sela tao anaty RIPA lysis buffer (misy cocktail inhibitor protease sy phosphatase) ary avy eo dia nosentrifugasiona tamin'ny 13.000 rpm nandritra ny 20 minitra tamin'ny 4°C mba hanesorana ny poti-sela. Nomena proteinina dimampolo mikrograma isaky ny lalana, nosarahina tamin'ny SDS-PAGE 10%, ary avy eo nafindra tao amin'ny fonon'ny PVDF. Natao tao anaty ronono maina tsy misy tavy 5% tao anaty saline Tris-buffered (TBS) misy Tween 20 0.1% nandritra ny 1 ora tamin'ny mari-pana ao an-trano ny fanakanana. Notehirizina tamin'ny antibody voalohany anti-decorin bitro (nalevina 1:200; Boster, Wuhan, Sina) (nalevina 1:200; Bioss, Beijing, Sina) nandritra ny alina tamin'ny 4°C ny fonon'ny sela ary nihetsika tamin'ny andro faharoa; miaraka amin'ny antibody faharoa (immunoglobulin G anti-bitro osy amin'ny 1:40,000 dilution) afangaro amin'ny peroxidase horseradish (Boster, Wuhan, Sina) mandritra ny 1 ora amin'ny mari-pana ao an-trano. Hita tamin'ny alàlan'ny fitomboan'ny chemiluminescence eo amin'ny fonon'ny chemiluminescent taorian'ny taratra X ny famantarana ny Western blot. Ho an'ny fanadihadiana densitometric, dia nojerena sy norefesina tamin'ny alàlan'ny rindrambaiko BandScan ny blot ary naseho ho toy ny tahan'ny immunoreactivity amin'ny tubulin immunoreactivity ny valiny.
Natao tamin'ny fampiasana ny rindrambaiko SPSS16.0 (SPSS, Etazonia) ny kajy statistika. Ny angon-drakitra nangonina nandritra ny fanadihadiana dia naseho ho salan'isa ± fivilian-dàlana mahazatra (salan'isa ± SD) ary nohadihadiana tamin'ny fampiasana fanadihadiana momba ny fiovaovan'ny fomba miverimberina (ANOVA) mba hamaritana ny fahasamihafana misy eo amin'ireo vondrona roa. Ny P < 0.05 dia noheverina ho manan-danja ara-statistika.
Noho izany, ny fametrahana modely biby momba ny MC amin'ny alàlan'ny fametrahana NP autologous ao amin'ny vatan'ny hazondamosina sy ny fanaovana fandinihana makroanatomika, fanadihadiana MRI, fanombanana histolojika ary fanadihadiana biolojika molekiola dia mety ho lasa fitaovana manan-danja amin'ny fanombanana sy fahatakarana ny fomba fiasan'ny MC olombelona sy ny fampivoarana fitsaboana vaovao.
Ahoana ny fomba hanonona ity lahatsoratra ity: Han, C. et al. Napetraka ny modely biby momba ny fiovan'ny Modic tamin'ny alàlan'ny fametrahana ny nucleus pulposus autologous tao amin'ny taolana subchondral amin'ny hazondamosina lumbar. Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., ary Boos, N. Sary famantarana resonance magnetika amin'ny hazondamosina lumbar: fihanaky ny herniation sy ny fihazonana ny kapila, ny fanerena ny fakany nerveo, ny tsy fetezan'ny takelaka farany, ary ny osteoarthritis amin'ny tonon-taolana amin'ny mpilatsaka an-tsitrapo tsy misy soritr'aretina. tahan'ny. Radiology 209, 661–666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS, ary Leboeuf-Eed, K. Fiovana Modic sy ny fifandraisany amin'ny zavatra hita ara-pitsaboana. Gazety Eoropeana momba ny Hazondamosina: famoahana ofisialin'ny Fikambanana Eoropeana momba ny Hazondamosina, ny Fikambanana Eoropeana momba ny Fahasimban'ny Hazondamosina, ary ny Fikambanana Eoropeana momba ny Fikarohana momba ny Hazondamosina Cervical 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma, M., et al. Fiovana kely eo amin'ny takelaka farany amin'ny hazondamosina lumbar: fihanaky ny aretina sy ny fifandraisana amin'ny fanaintainan'ny lamosina ambany sy ny sciatica amin'ny mpiasa lahy antonontonony. Spine 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., ary Dalinka, M. MRI amin'ny fiovan'ny tsoka taolana eo akaikin'ny takelaka farany amin'ny aretina miharatsy amin'ny hazondamosina lumbar. AJR. Gazety Amerikana momba ny Radiolojia 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ, ary Carter, JR Aretin'ny kapila miharatsy: fanombanana ny fiovan'ny tsoka hazon-damosina amin'ny alàlan'ny MRI. Radiology 166, 193–199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS, ary Carter, JR Sary maneho ny aretin'ny kapila miharatsy. Radiology 168, 177–186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, et al. Ireo famantarana mialoha ny fiovan'ny takelaka farany amin'ny taolana neovertebral (Modic) eo amin'ny mponina amin'ny ankapobeny. Gazety Eoropeana momba ny Hazondamosina: Famoahana Ofisialin'ny Fikambanana Eoropeana momba ny Hazondamosina, ny Fikambanana Eoropeana momba ny Fahasimban'ny Hazondamosina, ary ny Fikambanana Eoropeana momba ny Fikarohana momba ny Hazondamosina Cervical, Diviziona 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
Albert, HB sy Mannisch, K. Fiovana modika aorian'ny herniation ny kapila lumbar. Gazetin'ny Hazondamosina Eoropeana: Famoahana Ofisialin'ny Fikambanan'ny Hazondamosina Eoropeana, ny Fikambanan'ny Hazondamosina Eoropeana momba ny Fahasimban'ny Hazondamosina ary ny Fikambanan'ny Eoropeana momba ny Fikarohana momba ny Hazondamosina Cervical 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., ary Kaapa, E. Ny fiovana karazana I modic dia afaka maminavina ny fahasimban'ny kapila miovaova haingana: fanadihadiana mialoha mandritra ny 1 taona. European Spine Journal 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ sy Fan, SW Fiovana ara-modika: mety ho antony sy ny fandraisana anjara amin'ny fahasimban'ny kapila lumbar. Fiheveran-kevitra ara-pitsaboana 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV Fahatapahan'ny kapila anatiny. Olana amin'ny fihoaran'ny kapila nandritra ny 50 taona. Hazondamosina (Phila Pa 1976) 11, 650–653 (1986).
Fotoana fandefasana: 13 Desambra 2024